GB/T 4789.5—2003.
1范围
GB/T 4789.5规定了食品中志贺氏菌的检验方法。
GB/T 4789.5适用于各类食品和食物中毒样品中志贺氏菌的检验。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的较新版本。凡是不注日期的引用文件,其较新版本适用于本标准。
GB/T 4789.28--2003食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂
3设备和材料
3.1冰箱;0℃～4℃。
3.2恒温培养箱,36℃士1℃.42℃.
3.3显微镜:10×~100×。
3.4均质器或灭菌乳钵。
3.5架盘药物天平:0 g~500 g,精确至0.5 g。
3.6灭菌广口瓶:500 mL。
3.7灭菌锥形瓶:500 mL250 mL。
3.8灭菌培养皿;直径90 mm。
3.9硝酸纤维素滤膜:150 mm×50 mm,90.45 um。临用时切成两张,每张70 mm×50 mm,用铅笔划格,每格6 mm×6 mm。每行10格,分6行。灭菌备用。
6操作步骤
6.1增菌
以无菌操作取检样25 g(mL),加入装有225 mL GN增菌液的广口瓶内,固体食品用均质器以8 000 r/min~10 000 r/min打碎1 min.或用乳钵加灭菌砂磨碎,粉状食品用金属匙或玻璃棒研磨使其乳化,于36℃培养6 h~8 h。培养时间视细菌生长情况而定v当培养液出现轻微混浊时即应中止培养。
6.2分离和初步生化试验
6.2.1取增菌液1环,划线接种于HE琼脂平板或SS琼脂平板一个;另取1环划线接种于麦康凯琼脂平板或伊红美蓝琼脂平板一个,于36℃培养18 h~24 h,志贺氏菌在这些培养基上呈现无色透明不发酵乳糖的菌落。
6.2.2挑取平板上的可疑茵落,接种三糖铁琼脂和葡萄糖半固体各一管。一般应多挑几个菌落,以防